乔晋琳1  王健瑞2  马广昊1  顾 群1  路 平1  刘凤桐3  陈 蕾3

摘要：目的 观察针刀疗法对第3腰椎横突综合征兔血浆TXB2、6-keto-PGF1α水平的影响。方法 将实验兔18只随机分为针刀干预组、模型对照组、正常对照组，每组6只，于造模后10d、15d、25d、30d检测结果，进行统计学分析。结果 针刀干预组10d、15d、25d、30d TXB2含量与模型组比较差异无显著性（P>0.05）， 6-keto-PGF1α含量、TXB2/6-keto-PGF1α比值与模型组差异有非常显著性（P<0.01）。结论 针刀干预使6-keto-PGF1α、TXB2/PGF1α比值呈良性改变，从而改善局部微循环，促进炎症吸收，增强了组织修复再生能力。

关键词：针刀疗法；第3腰椎横突综合征；血栓素B2；；6—酮—前列腺素

[Absract]  Methods  To observe effect of acupotomology  on the third lumber vertebrae transverse foramen syndrome of animal test model about blood plasma (TXB2、6-keto-PGF1α) in rabbits .Methods Eighteen rabbits were divided randomly into 3 groups : acupotomology groups, model contrast groups, normal contrast groups (n=6). To measure the results on the 10d, 15d, 25d, 30d  after the model was come into existence, its were carried out by statistical analysis. Results Compared with the model group, the results of TXB2 in the acupotomology groups have not significant difference on the 10d, 15d, 25d, 30d (P>0.05) . The ratio (TXB2/6-keto-PGF1α) between acupotomology groups and model contrast groups has markedly significant difference  (P<0.01). Conclusion Acupotomology therapy make its (6-keto-PGF1α、TXB2/6-keto-PGF1α) better change, impove local tiny circulation, absord acceleratly inflammation ,build up rehabilitation and rebirth tissues.

[Key words]：Acupotomology Therapy ; The third lumbar processus transverses vertebrarum syndrome ；TXB2 ；6-keto-PGF1α

针刀疗法治疗第3腰椎横突综合征已在临床应用中得到证实[1][2]。但关于其治疗机制的研究尚无报告。血栓素A2（TXA2）和前列环素（PGI2）均为花生四烯酸的代谢产物。研究发现[3]，两者在创伤介导的无菌性炎症过程中扮演着重要角色。两者的比值在一定程度上反映局部血管舒缩和微循环功能状态，同时也反映炎症的修复过程和预后。血栓素B2(TXB2)和6—酮—前列腺素（6-keto-PGF1α）分别为TXA2和PGI2的代谢产物。我们通过对第3腰椎横突综合征兔动物模型的制备，采用针刀干预及对照方法，观察兔血浆中TXB2和6-keto-PGF1α的含量变化，探讨针刀疗法对血浆TXB2和6-keto-PGF1α的影响。

1.      材料和方法

1.1实验动物

健康雄性日本大耳白纯种兔18只，一级，体重2～2.5㎏，由北京富华实验动物养殖场提供，中国中医研究院基础所实验动物中心一级动物室喂养。

1.2主要药物与试剂

1.2.1  明胶，南京制药三厂。

1.2.2  6—keto—PGF1α放免药盒，由解放军总医院科技开发中心提供，海军总医院海科锐放免中心测定。

1.2.3  TXB2放免药盒，由解放军总医院科技开发中心提供，海军总医院海科锐放免中心测定。

1.3 主要仪器

显微外科手术器械、DS2—1手术放大镜（6×），光学显微镜。

1.4 实验兔腰三横突综合征模型制备

选用健康、雄性日本大耳白纯种兔18只，体重2～2.5㎏，采用王健瑞[4]的方法制作第三腰椎横突综合征模型兔12只，以10%速眠宁（25ng/㎏）肌注麻醉，无菌条件下在腰脊部做纵切口3cm，向两侧剥离骶棘肌，显露L3~L4棘突，完整分离腰脊深筋膜脊神经后支穿出部分。将0.5×0.5cm大小明胶海绵植入L3横突后半段深筋膜下，保留完整肌筋膜，彻底止血，用0号线等距离缝合动物骶棘肌筋膜及皮肤，切口用庆大霉素冲冼，伤口用免贴妥喷雾。麻醉苏醒后与另外6只正常兔在同一饲养条件下饲养。

1.5分组及检测方法

1.5.1            分组：将实验兔随机分为：模型对照组（n=6）：无治疗干预；针刀治疗组（n=6）：饲养14d时，在无菌条件下用Ⅰ型4号针刀于实验兔腰三横突后半段表皮投影处刺入至深筋膜下，行疏通切割2~3刀，出针，按压针孔止血；选择正常兔作正常对照组（n=6）。于模型制备第10d、15d、20d、30d进行各项观察指标检测。

1.5.2  检测方法:于第10d、15d、25d、30d采用耳缘背侧静脉穿刺采血3ml，即刻与消炎痛—EDTA.Na2液0.2ml在一次性5ml空针管内混匀，注入试管内，4℃离心3500rpm，15min，分离血浆,－20℃保存，取上清液放免法测定6-keto-PGF1α和TXB2。

1.5.3  细菌学培养：于30d行气栓法处死动物。立即取腰3椎体及横突周围新鲜组织作牛血清细菌培养。

1.6 统计学分析

采用SPSS10.0软件包，各组数据均以平均值±标准差（X±S）表示，组间比较用t检验，P<0.05为差异有显著性，P<0.01为差异有非常显著性。

2 结 果

2.1 血浆TXB2和PGF1α的变化（表1）

表1      兔不同时期血浆TXB2和6-keto-PGF1α的含量变化（n=6, Pg/ml, x±s）

               10d                    15d                              25d                           30d

分组        TXB2   6-keto- PGF1α  TXB2  6-keto-PGF1α  TXB2  6-keto-PGF1α  TXB2  6-keto- PGF1α

针刀治疗组   590.3±23  583±31    684.7±20a  765±16d    651.5±18b  427±34e       616±12c  256±38f

模型对照组   646.4±16   536±17    769±19g  342±15j    732±24h   259±22k      620.6±23i  962±30l

正常对照组   601.5±20   860±21    672±13   517±28    659±17    440±14      669.5±28  251±27

注：与模型组比较： P>0.05,ta=2.13, tb=2.43, tc=2.4;  P<0.01,td=3.84,te=3.71,tf=4.17.

与正常组比较:P<0.05, tg=2.46, th=2.44; P>0.05, ti=2.32. P<0.01, tj=3.87, tk=3.96, tl=4.16.

从上表看出15d、25d、30d针刀组与模型组相比6-keto-PGF1α升高，差异有非常显著性（P<0.01）；而针刀组TXB2与模型组差异无显著性（P>0.05）。15d、25d模型对照组与正常组相比6-keto-PGF1α降低，30d升高，差异有非常显著性（P<0.01）。15d, 25d模型组与正常组相比TXB2升高，差异有显著性（P<0.05）,30d与正常组差异无显著性（P>0.05）。

表2    兔不同时期血浆TXB2/6-keto-PGF1α比值变化（n=6,  x±s）

分  组           10d            15d            25d            30d

针刀治疗组     1.01±0.74     0.9±1.25 a      1.53±0.53be     2.41±0.32cf

模型对照组     1.21±0.84     2.25±1.27d      2.83 ±1.09g    0.70 ±0.77h

正常对照组     0.70±0.95     1.30 ±0.46     1.50 ± 2.0     2.67 ±1.04

注：与模型组比较：P<0.01, ta=3.91, tb=3.78, tc=3.98,

与正常组比较:P<0.01,td=3.74; tg=3.83, th=4.12;  P>0.05, te=2.31, tf=2.17; 

由上表可看出：15d, 25d,30d时,针刀组TXB2/6-keto-PGF1α与模型组相比差异非常显著（P<0.01）；而模型组TXB2/6-keto-PGF1α较正常组差异也有非常显著性（P<0.01）。25d时模型对照组TXB2/6-keto-PGF1α值较针刀组升高，30d时却反降低，两组差异有非常显著性（P<0.01）。

2.2 细菌学培养结果：培养标本均无细菌生长。

3 讨 论

3.1  TXA2及PGI2均为花生四烯酸的代谢产物，TXA2主要在血小板合成，PGI2主要在血管内皮细胞内合成。但二者半衰期极短，很快代谢TXB2及6-keto-PGF1α。因此，通常测定TXB2和6-keto-PGF1α来了解前两种活性物质水平。早在1976年Boot等[5]报道，TXA2能引起急性炎症反应，使中性粒细胞向炎症部位移动，且与剂量呈正相关。Brune[3]报道巨噬细胞在释放PGI2的同时也可产生TXA2。TXA2具有强烈的收缩血管和促进血小板聚集作用，并能介导细胞及溶酶体膜的破坏[6]。PGI2具有强烈舒张血管，抑制血小板聚集及稳定细胞膜的作用[7]。正常情况下，TXA2及PGI2在体内处于动态平衡状态，以维持血管张力和血小板的稳定，其两者的比值在一定程度上反映对血管舒缩状态和微循环状态的影响。如两者浓度升高，平衡失调，则将导致组织损伤引起病理介导作用。

3.2 本实验研究表明：由于针刀干预，15d, 25d时针刀组6-keto-PGF1α值上升，表明局部微血管扩张，组织供氧量增多，炎性吸收增强。而模型组由于未加干预，TXB2升高，6-keto-PGF1α浓度降低，表明局部微血管收缩，血小板聚集，组织缺氧，微循环障碍而出现瘀血表现。30d时针刀组6-keto-PGF1α值趋正常，而模型组反升高（P<0.01），表明模型组组织修复慢。因此，针刀干预似可将组织修复过程提前。另外，从30d组织形态学观察，也可证实这一点。总之，针刀组15d,25d的6-keto-PGF1α值较模型组升高（P<0.01），而随着组织损伤的修复，30d则趋于正常。针刀干预对6-keto-PGF1α值具有良性影响作用。

3.3  尽管针刀对软组织修复的作用机制尚未明了，但从表2看出，15d, 25d时针刀组TXB2/6-keto-PGF1α比值与正常组差异不显著（P>0.05），表明针刀干预后TXB2/6-keto-PGF1α呈良性表现，相对平衡。而模型组于15d、25d时比值偏高，表明局灶微循环障碍，组织缺血缺氧严重，修复缓慢。黄跃生等[8]认为在严重烧伤早期，TXB2/6-keto-PGF1α失衡可能是烧伤早期血液流变学变化的因素之一。从软组织损伤急性期转为慢性期的修复过程来看，可推测TXB2/6-keto-PGF1α失衡可能也是软组织损伤修复期血液流变学变化的因素之一。其可能机理是：（1）使血管收缩，致血流阻力增大，血流减慢和粘滞性增高；（2）作用于血小板表面的特异性受体[8]，使胞浆Ca+2增高，致血小板变形，聚集和释放反应，（3）PGI2能抑制血小板聚集和释放反应，并可解聚血小板聚集物和降低血管阻力[9]。因此,PGI2相对不足，也可发生血流变学紊乱。

3.4  针刀干预使局部TXB2/6-keto-PGF1α比值呈良性改变，从而改善局部微循环，使组织供氧增多，促进炎症吸收，增强了组织再生能力。因此，我们说针刀疗法具有活血化瘀的作用机制。从生物力学观点看，针刀疗法通过切割松解，能使局部高应力的软组织减张减压。同时针刀作为一种外源性致炎因素，可调动机体自身的组织修复反应，释放TXA2、PGI2，并达到合适修复的剂量。因为从临床角度看，针刀干预的剂量大小，与病灶修复程度密切相关。剂量过大反而引起修复过程延长。因此，针对不同的病灶，选择合适的剂量，才能使TXB2/6-keto-PGF1α比值平衡，促进组织尽早修复，是我们下一步应研究的课题。

参考文献

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[2]Li JB. Therapy of the third lumbar transverse process syndrome by Acupotomology Looseness.hongguo Linchuang Kangfu (Clin J Clin Rehabil)2002,6(18):878-9.

[3] Brane K,Glatl M,Kalin K,et al.pharmacological control of prostaglandin and thromboxane release from macrophanges[J].Nature .1987,274(5668):261—263.

[4] Wangjianrui ,Qiaojinglin,Liufengtong.Establishment and experimental study of the third lumber vertebrae transverse foramen syndrome of animal test model in rats、rabbits. (Chinese Journal Of Physical Medicine Rehabilitation.) 2003.25 (6): 337—340

[5] Boot JR,Dawson w,Ann Kitchen E.The chemotactic activity of thromboxane B2:a possible role of inflammation (abstract)[J].J physiology,1976,257（1）:47—48

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[7] Moncada S,Gryglewski R,Bunting S,et al.An eniyme isolated from ateries transfroms prostaglandin endoperoxides to an unstable substance that in habits platelet aggregation[J]. Nature,1976,263(4763):663—665

[8] Huang yuesheng,Yang zong chen,Li ao.The effect on the unbalance of the plasma TXB2 and PGF1α in early damage of the burn [J]. Chinese Journal Of Medicine.1993，73（10）：615—617.

[9] HuangYS,LiA,Yang ZC,Effects of smoke inhalation injury on thromboxane levels and platelet counts[J] .Burns 1988,14（6）:440—442.

作者单位：1000371 中国人民解放军海军总医院理疗科（乔晋琳、顾群、马广昊、路平）2北京中医药大学中药学院中药实验室，100029（王健瑞），3北京中医药大学东直门医院外科，100700（刘凤桐、陈蕾）

作者简介：乔晋琳，男，1963年生。山西省太原市人。汉族。1986年贵阳中医学院中医系毕业，学士学位。 副主任医师、副教授 。现任海军总医院理疗科主任。主要从事针灸学、软组织外科疾病的诊治研究，发表论文23篇 ，主编《Hang Acupuncture Therapy 》等3部论著。